نقش پمپ های افلاکس در مقاومت آنتی بیوتیکی p. aeruginosa جدا شده از بیماران سوختگی

باکتریpseudomonas aeruginosa یک باکتری گرم منفی و پاتوژن فرصت طلب انسانی است. از آنجایی که بوجود آمدن و ظهور سویه های دارای مقاومت چندگانه mdr = multi drug resistant در بخشهای سوختگی رو به افزایش و شاخص ترین مکانیسم مقاومت آنتی بیوتیکی در این پاتوژن سیستم افلاکس (efflux) می باشد در این مطالعه 50 سویه p.aeruginosa از نمونه های سوختگی جمع آوری و مورد بررسی قرار گرفت. مقاومت آنتی بیوتیکی به روش انتشار در آگار در برابر 7 آنتی بیوتیک انجام شد و سپس میزان حساسیت به 2 آنتی بیوتیک به روش میکرودایلوشن صورت گرفت و نتایج به صورت mic بدست آمد. تست های mic یک بار در حضور ماده cccp (کربونیل سیانید m- کلروفنیل هیدرازون) به عنوان مهار کننده سیستم تراوشی وابسته به نیروی محرکه پروتونی و یک بار در غیاب این ماده بررسی شد. سپس از بنزالکونیوم کلراید (bkc) به عنوان سوبسترای اختصاصی پمپ mate استفاده شد و تست های mic به روش میکرودایلوشن در حضور و در غیاب cccp بررسی گردید .در حضور cccp کاهش mic مشاهده شد. به منظور تعیین میزان اختصاصی بودن عملکرد سیستم تراوشی در باکتری p.aeruginosa تجمع سیپروفلوکساسین توسط دستگاه اسپکتروفلوریمتر اندازه گیری شد. سپس حضور ژن سیستم افلاکس mate یا سیستم pmp m به کمک روش pcr در سویه های بالینی جدا شده تکثیر شد. نتایج حاصل از آنتی بیوگرام ایزوله های بیماران سوختگی به شرح زیر است : میزان درصد مقاومت به سیپروفلوکساسین 70% ، کربنی سیلین 26% آمیکاسین 16% پیپراسیلین 11%و ایمی پنم 6 %. mic برای آنتی بیوتیک سیپروفلوکسا سین و افلوکساسین در سویه های مقاوم mg/l 32 بود . میزان mic در حضور cccp در سویه های بیان کننده افلاکس فعال حداقل یک رقت کاهش یافت. سپس میزان mic در حضور cccp در برابر bkc بررسی شد و فقط 3 باکتری که دارای ژن افلاکس pmp m مربوط به پمپ mate بودند و توسط pcr ژن آنها جدا سازی شده بود یک رقت کاهش در میزان mic را نشان دادند. تست تجمع دارو نشان داد که سیستم های تراوشی در این باکتری قادر به تراوش آنتی بیوتیک و bkc است. بااستفاده از روش pcr مشخص شد که 6% درصد از سویه های بالینی مورد مطالعه سیستم تراوشی pmpm را به عنوان عامل ایجاد کننده مقاومت ذاتی چند دارویی در باکتری p. aeruginosa بر روی کروموزوم خود دارند.